Создание мутанта Pectobacterium carotovorum 3-2 по гену целлюлазы (celV)



Дата28.04.2017
өлшемі759 b.


БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Биологический факультет Кафедра молекулярной биологии

  • Характеристика гена целлюлазы Pectobacterium carotovorum


Pectobacterium carotovorum

  • Бактерии Pectobacterium carotovorum наносят значительный ущерб растениям картофеля, вызывая заболевание «черная ножка» (заболевание, приводящее к гибели растения вскоре после прорастания клубней), а также мягкую гниль клубней при хранении.



Основными факторами вирулентности для Pectobacterium считаются:



Предполагается, что целлюлаза является одним из основных факторов вирулентности Pectobacterium carotovorum. Молекулы целлюлазы состоят из субстратсвязывающего домена на С-конце, соединенного с помощью короткого полилинкерного участка с каталитическим доменом на N-конце.



Цель работы:



Схема получения мутантного штамма P. carotovorum по гену celV



Создание мутанта Pectobacterium carotovorum 3-2 по гену целлюлазы (celV)

  • Чашечный тест на продукцию секретируемой целлюлазы клетками штамма Pca JN42 (сектор 1) и его мутантов BA1 (сектор 2), BA2 (сектор 3), ВА3 (сектор 4).



Проверка вирулентности штаммов, мутантных по гену целлюлазы, при заражении клубней картофеля



Проверка вирулентности штаммов, мутантных по гену целлюлазы, при заражении стеблей картофеля



Выводы

  • Введение суицидной плазмиды с фрагментом гена целлюлазы celV в клетки Pectobacterium carotovorum 3-2 привело к инактивации хромосомной копии этого гена.

  • У клеток клонов P. carotovorum 3-2 с инактивацией гена celV целлюлазная активность использованными методами не детектируется.

  • Инактивация гена celV не оказывает существенного влияния на способность бактерий P. carotovorum 3-2 инфицировать клубни картофеля.

  • Инактивация гена celV у бактерий P. carotovorum 3-2 не оказывает существенного влияния на развитие симптомов «черной ножки» при заражении стеблей картофеля.



  • Спасибо за внимание!




Достарыңызбен бөлісу:


©stom.tilimen.org 2019
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет