Лабораторные методы диагностических исследований



Дата25.03.2017
өлшемі446 b.
#6868
түріИсследование


Лабораторные методы диагностических исследований

  • Лабораторные методы диагностических исследований

  • (аналитические методы)


Основные разделы клинической лабораторной диагностики

  • Химико-микроскопическое исследование биологических материалов

  • Гематологические исследования

  • Исследования системы гемостаза

  • Биохимические исследования

  • Микробиологические исследования

  • Иммунологические исследования

  • Исследование реологических свойств крови

  • Цитохимические исследования

  • Лекарственный мониторинг

  • Иммуноферментный анализ

  • Методы молекулярной диагностики



Химико-микроскопическое исследование биологических материалов

  • Моча

  • физические свойства

  • химическое исследование

  • микроскопия осадка

  • Кал

  • физические свойства

  • химическое исследование

  • микроскопия

  • обнаружение простейших

  • обнаружение гельминтов

  • Желудочная секреция

  • Экссудаты

  • физико-химические свойства

  • Микроскопия

  • Спинномозговая жидкость

  • физические свойства

  • химическое исследование

  • микроскопия



Методы исследования системы гемостаза:

  • Исследование сосудисто-тромбоцитарного (первичного) гемостаза;

  • Исследование свертывания крови (коагуляционный гемостаз);

  • Исследование фибринолитической системы крови



Методы клинической биохимии

  • Белки и белковые фракции

  • Ферменты и изоферменты

  • Низкомолекулярные азотистые вещества

  • Показатели пигментного обмена

  • Глюкоза и метаболиты углеводного обмена

  • Липиды, липопротеины и аполипопротеины

  • Гормоны

  • Неорганические вещества (натрий, калий, показатели метаболизма железа)

  • Кислотно-основное состояние











Морфологические характеристики клеток крови



Лейкоцитарная формула















Устройство кондуктоме-трической измерительной камеры для подсчета клеток с использованием гидродинамической фокусировки

  • Устройство кондуктоме-трической измерительной камеры для подсчета клеток с использованием гидродинамической фокусировки





Абсолютный объем частиц V может быть определен из следующего выражения:

  • Абсолютный объем частиц V может быть определен из следующего выражения:

  • V = А2 ∙fk∙E/ r∙i∙F,

  • Где

  • А – площадь поперечного сечения отверстия,

  • fk – поправочный коэффициент для учета геометрии отверстия и пути прохождения частицы через него,

  • r - удельное сопротивление жидкой среды,

  • i – ток через отверстие (неизменный),

  • F – коэффициент, учитывающий форму и проводимость частицы,

  •  Е – амплитуда вырабатываемого импульса напряжения.











Недостатки кондуктометрических счетчиков:

  • Недостатки кондуктометрических счетчиков:

  • Анализируемые частицы обязательно должны находиться в жидком электролите, проводимость которого известна.

  • Проводимость же биологических жидкостей, величина неопределенная и переменная, зависящая от многих факторов.

  • При подсчете микрочастиц кондуктометрическим методом существуют очень жесткие ограничения на диаметр анализирующего отверстия, который должен быть порядка размеров микрочастиц.



Обязательные процедуры обслуживания прибора

  • Обязательные процедуры обслуживания прибора

  • Ежедневно: промывка Е-Z раствором для белковой очистки.

  • Еженедельно: очистка пробоотборника с помощью раствора Probe Cleaner

  • Ежеквартально: осмотр состояния блока шприцов, очистка крышек измерительных камер.

  • Очистка по требованию прибора c помощью раствора Probe Cleaner:

  • Текущие процедуры:

    • Замена реагентов
    • Осушка трубок при коротко-временном выключении прибора
    • Консервация прибора при длительном выключении более 5 дней
  • По требованию:

    • Раз в 3-6 месяцев в зависимости от нагрузки на прибор - замена блока обтирки иглы
    • Замена фильтров вакуума или давления
    • Замена наконечника поршня шприца разбавителя (1 раз в год или реже в зависимости от загрузки)


Весь ряд гематологических анализаторов по виду выполняемых исследований можно разделить на четыре типа

  • Весь ряд гематологических анализаторов по виду выполняемых исследований можно разделить на четыре типа

  • К первому типу относятся приборы, выполняющие анализ по небольшому числу показателей, обычно по 6–8, и без дифференцирования лейкоцитов на субпопуляции.

  • Ко второму классу следует отнести 16-20-параметровые анализаторы, так называемые 3-DIFF системы, способные дифференцировать лейкоциты на три субпопуляции.

  • К третьему классу относятся так называемые 5-DIFF системы, способные дифференцировать лейкоциты по 5 популяциям и позволяющие определять до 28 параметров.

  • Четвертый класс – анализаторы с модулем дифференцирования ретикулоцитов. Общее количество параметров, определяемых анализаторами с таким модулем доходит до 40.



Пробоподготовка По способу подготовки проб гематологические анализаторы делятся на полуавтоматические анализаторы,

  • Пробоподготовка По способу подготовки проб гематологические анализаторы делятся на полуавтоматические анализаторы,

  • В них подготовка проб отделена непосредственно от анализа и производится в специальных приборах — дилютерах. Вторая группа — полностью автоматические анализаторы  — в свою очередь делится на еще две группы. Приборы первой группы позволяют работать только с предразведенной кровью, вторая группа анализаторов может работать непосредственно с цельной кровью. Для гематологического анализа может использоваться как капиллярная, так и венозная кровь.



Производительность

  • Производительность

  • Приборы первых двух классов производят до 60 анализов в час.

  • Приборы старшего класса имеют производительность от 60 до 120 анализов в час. Скорость работы приборов лимитирована как самой методикой исследования, так и особенностями подготовки проб.



Объем пробы Современные гематологические анализаторы используются для анализа от 10 до 300 микролитров цельной крови. Более низкие объемы крови позволяют использовать систему в педиатрии, а также более экономно расходовать кровь, что дает возможность проведения повторных исследований. Кроме того, более низкие объемы проб снижают потребление реагентов.

  • Объем пробы Современные гематологические анализаторы используются для анализа от 10 до 300 микролитров цельной крови. Более низкие объемы крови позволяют использовать систему в педиатрии, а также более экономно расходовать кровь, что дает возможность проведения повторных исследований. Кроме того, более низкие объемы проб снижают потребление реагентов.



Реагентная база Помимо подготовки проб большое значение имеет реагентная база. Количество разных реагентов, используемых анализатором, существенно влияет на себестоимость и качество исследований. Анализаторы младших классов могут работать как реагентами, произведенными фирмой-изготовителем, так и с реагентами других производителей, что обычно не сказывается на аналитическом качестве исследования, но может существенно повлиять на работоспособность прибора. Открытые системы Закрытые системы - приборы могут работать только с реагентами, произведенными фирмой-изготовителем.

  • Реагентная база Помимо подготовки проб большое значение имеет реагентная база. Количество разных реагентов, используемых анализатором, существенно влияет на себестоимость и качество исследований. Анализаторы младших классов могут работать как реагентами, произведенными фирмой-изготовителем, так и с реагентами других производителей, что обычно не сказывается на аналитическом качестве исследования, но может существенно повлиять на работоспособность прибора. Открытые системы Закрытые системы - приборы могут работать только с реагентами, произведенными фирмой-изготовителем.



Система представления информации Обычной формой предоставления результата являются абсолютные и относительные показатели, а также гистограммы и флаги. Использование флагов и гистограмм существенно упрощает расшифровку результатов анализа. Наличие у приборов специальных интерфейсов, позволяющих выводить информацию на принтер, внутри лабораторную сеть или отдельно стоящий компьютер, является в настоящее время обязательным требованием. Также важным является сохранение результатов исследования в памяти прибора.

  • Система представления информации Обычной формой предоставления результата являются абсолютные и относительные показатели, а также гистограммы и флаги. Использование флагов и гистограмм существенно упрощает расшифровку результатов анализа. Наличие у приборов специальных интерфейсов, позволяющих выводить информацию на принтер, внутри лабораторную сеть или отдельно стоящий компьютер, является в настоящее время обязательным требованием. Также важным является сохранение результатов исследования в памяти прибора.







При выборе гематологического анализатора следует учитывать целый ряд факторов:

  • При выборе гематологического анализатора следует учитывать целый ряд факторов:

  • Измеряемые параметры

  • Метод исследования

  • Производительность прибора

  • Автоматическая или полуавтоматическая подготовка проб

  • Объем пробы

  • Реагентная база

  • Удобная система выдачи информации

  • Наличие программы контроля качества

  • Совокупная стоимость владения



Проточная цитометрия



Принцип работы оптического счетчика частиц

  • Принцип работы оптического счетчика частиц









Optical Detection: Scattering



Сигналы, получаемые при измерении методом "движущейся щели", а - параметры клетки, б - профиль сигнала, в - измеряемые параметры и пороги измерения

  • Сигналы, получаемые при измерении методом "движущейся щели", а - параметры клетки, б - профиль сигнала, в - измеряемые параметры и пороги измерения



Cell Sorting: Droplet

  • Theory

    • Piezoelectric transducer used to generate periodic vibrations.
    • Fluid stream is vibrated to form drops that are uniformly separated.
    • Depending on its characteristics, each drop is charged by a strong electrical pulse.
    • External electrical field deflects desired cells into collecting reservoir.
















Датчик заполнения пробой



. Оптический датчик заполнения трубок







Так выглядят эритроциты на снимке, сделанном в сканирующем электронном микроскопе





Сравнение проточного и микроскопического методов цитоанализа



Пульсоксиметрия



Что измеряет пульсоксиметр?

  • 1. Насыщение гемоглобина артериальной крови кислородом – среднее количество кислорода, связанное с каждой молекулой гемоглобина. Данные выдаются в виде процента насыщения

  • 2. Частота пульса – удары в минуту в среднем за 5-20 секунд.

  • 3. Фотоплетизмограмму – изменение объема крови в исследуемом участке

  • Пульсоксиметр не дает информации о:

  • содержании кислорода в крови;

  • количестве растворенного в крови кислорода;

  • дыхательном объеме, частоте дыхания;

  • сердечном выбросе или артериальном давлении.













Калибровочная кривая пульсоксиметра

















Классификация оптических методов исследования

  • Классификация по спектральным характеристикам оптического излучения:

    • а) Фотометрические
    • б) Спектрофотометрические
  • 2. Классификация по виду взаимодействия вещества с излучением:

    • а) Абсорбционная фотометрия
    • б) Нефелометрия
    • в) Турбидиметрия
    • г) Рефлектометрия
    • д) Эмиссионная фотометрия
    • е) Люминисцентная фотометрия
  • 3. Классификация методов по объектам исследования:

    • а) Методы исследования биопробы и жидкости (аналитические)
    • б) Методы, предназначенные для исследования организма.


Оптические измерительные приборы

  • Фотометры и спектрофотометры

  • Денситометры

  • Флюориметры и спектрофлюориметры

  • Пламенные фотометры

  • Люминометры

  • Нефелометры



Принцип метода

  • Фотометрические методы исследования базируются на способности жидких сред (растворов) поглощать световое излучение.

  • В основу абсорбционного метода анализа положен обобщенный закон Бугера–Ламберта–Бера. Он базируется на двух законах.

    • Относительное количество энергии светового потока, поглощенного средой, не зависит от интенсивности излучения. Каждый поглощающий слой одинаковой толщины поглощает равную долю проходящего через эти слои монохроматического светового потока.
    • Поглощение монохроматического потока световой энергии прямо пропорционально числу молекул поглощающего вещества.
  • Величина пропускания Т обычно измеряется в процентах и меняется в диапазоне от 0 до 100%. Поглощение (абсорбция) А, экстинкция (оптическая плотность) Е – величины безразмерные. Часто они оцениваются в Беллах или единицах оптической плотности.



Оптическая схема



Схема одноканального абсорбционного фотоколориметра

  • 1 – источник излучения 2 – оптическая избирательная система, 3а – исследуемое вещество, 3б – вещество сравнения, 4 – фотоприемное устройство, 5 – устройство преобразования информации, 6 – устройство регистрации и отображения информации.





Структура двулучевого одноволнового фотометра



Схема двухволнового одноканального фотометра



Билирубинометры



Спектрофотометры

  • Основное отличие спектрофотометра от электрофотоколориметра состоит в возможности пропустить через исследуемую пробу световой поток любой нужной длины волны, проводить фотометрические измерения, сканируя весь диапазон длин волн не только видимого (VIS) света от 380 до 750 нм, но и ближнего ультрафиолета (UV) от 190 до 380 нм.



Обобщенная структурная схема одноканального спектрофотометра



Монохроматоры

  • Призмы (220 – 950 нм)

  • Дифракционные решетки (200 – 800 нм)



Источники излучения

  • Водородные или дейтериевые газоразрядные лампы (200 - 360 нм)

  • Галогеновые лампы (200 - 360 нм)

  • Лампы накаливания с вольфрамовой нитью (360 – 800 нм)



Биохимические анализаторы

  • Полуавтоматические биохимические анализаторы

  • Полностью автоматические биохимические анализаторы



Автоматические биохимические анализаторы

  • “открытые” системы Режимы доступа:

    • “тест за тестом”
    • свободный доступ “тест за тестом” и/или “пациент за пациентом”
  • “закрытые” системы



Биохимические анализаторы

  • Конструкция реагентного блока:

    • “линейный”
    • “карусель”
  • Конструкция блока проб:

    • “линейный”
    • “карусель”
  • Конструкция реакционного узла:

    • проточная кювета
    • термостатируемая платформа с пробирками






Развитие окраски комплекса по времени





Гидравлическая схема полуавтоматического биохимического анализатора





















Оборудование для иммуноферментного анализа













Измерение давления крови





Осциллометрический метод





Анализ осциллограммы





  • Рис. 1. Блок-схема монитора артериального давления (Серым цветом выделены модули, построенные на компонентах Freescale Semiconductor)













Plethysmography (3) Electric-Impedance Method





Схематическое изображение различных типов реографической кривой: а — норма, б — уменьшение кровенапонения органа (гиповолемический тип кривой), в — повышение тонуса сосудов, г — понижение тонуса сосудов, д — увеличение кровенаполнения органа (гиперволемия).

  • Схематическое изображение различных типов реографической кривой: а — норма, б — уменьшение кровенапонения органа (гиповолемический тип кривой), в — повышение тонуса сосудов, г — понижение тонуса сосудов, д — увеличение кровенаполнения органа (гиперволемия).















Каталог: study -> discypliny
study -> Генетика наука о наследственности и изменчивости организмов. Генетика наука о наследственности и изменчивости организмов
study -> Вопросы экологической паразитологии доц. Надежда Георгиевна Перевозчикова
study -> Курсовая работа "Моделирование развития аденокарциномы-755 " Дисциплина: "Моделирование в медицине"
study -> Анализаторы (сенсорные системы) Попробуйте последовательно ответить на несколько вопросов
study -> Желательно владение переводческой нотацией, или сокращенной записью
study -> Лабораторная работа №1 Очистка газа от кислых примесей абсорбцией алканоламинами


Достарыңызбен бөлісу:




©stom.tilimen.org 2022
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет