ИМПРЕГНАЦИЯ СЕРЕБРОМ ДЛЯ РЕТИКУЛИНОВЫХ ВОЛОКОН
Принцип:
Это аргирофильная неспецифическая реакция тонких стетеподобных поддерживающих волокон соединительной ткани (например, имеются в печени и костном мозге). Ретикулярные волокна – это молодые и тонкие отростки коллагеновых волокон, которые содержат в себе углеводные группы и способны связывать серебро, окисляясь до альдегидов. Но так как в них содержится очень мало углеводородов, необходима сенсибилизация (железоаммонийными квасцами).
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ: Определить наличие и характеристики тонких соединительнотканных волокон (поврежденных при многих патологических состояниях). Также полезна для дифференциальной диагностики некоторых типов опухолей.
КОНТРОЛЬ: лимфоузел или печень
РАСТВОРОЫ:
1. ОКИСЛИТЕЛЬ: 0.25% водный перманганат калия
2. ОБЕСЦВЕЧИВАЮЩИЙ РАСТВОР: 1% щавелевая кислота
3. ПРОТРАВА: 5% железоаммонийные квасцы
4. АММИАЧНОЕ СЕРЕБРО: готовить непосредственно перед использованием.
2 мл 10% водного нитрата серебра
1 мл 10% водного гидроксида натрия (или калия)
0.5 мл концентрированного аммиака
Хорошо перемешать. Большая часть осадка растворится через 1-2 минуты.
40 мл дистиллированной воды.
5. ПРОЯВИТЕЛЬ:
10 мл концентрированного формальдегида
40 мл дистиллированной воды.
Готовить перед использованием.
6. ТОНИРУЮЩИЙ РАСТВОР 0.2% хлорное золото
7. ВОССТАНАВЛИВАЮЩИЙ РАСТВОР: 5% водный тиосульфат натрия
8. ДОКРАСКА: 1% водный нейтральный красный
ПРОЦЕДУРА:
1. Депарафинировать и довести до воды как обычно. Промыть в дистиллированной воде.
2. Перманганат калия 5 минут. Промыть в воде из-под крана 1 минуту.
3. Обесцветить щавелевой кислотой по одному. Промыть в воде из-под крана 1 минуту.
4. Обработать железоаммонийными квасцами 5 минут.
Промыть в 4 сменах водопроводной воды по 3 минуты каждая.
5. Промыть в 2 сменах дистиллированной воды по 3 минуты каждая.
6. Аммиачное серебро 5 минут.
7. Быстро промыть в чистой дистиллированной воде (одно-два макания).
8. Формалин 1 минута.
9. Промыть в дистиллированной воде 2 смены по 3 минуты.
10. Тонировать хлорным золотом (до посерения срезов 1-3-5 минут). Этап можно пропустить и тогда фон будет желтым. Промыть в дистиллированой воде.
11. Тиосульфат натрия 1 минута.
12. Промыть в дистиллированной воде.
13. Докрасить ядра нейтральным красным. Этап необязательный. Вместо этого красителя можно использовать световой зеленый для окраски фона в зеленый цвет, пикриновую кислоту водную для желтого фона или практически любой краситель по указанию патолога, либо не докрашивать вообще.
14. Обезводить, просветлить, заключить по общепринятой в лаборатории схеме.
РЕЗУЛЬТАТ:
ретикулярные волокна черные
фон зависит от докраски
ядра красные.
Замечание:
1. Ядра могут окрашиваться в черный цвет серебром.
2. Избыток серебра после проявления формалином можно извлечь в 0.5% водном растворе красной кровяной соли. Затем продолжить этапы как в методе.
3. При недостаточном окрашивании серебром можно после формалина хорошо промыть срезы в дистиллированной воде и повторить этапы окраски с 4 пункта метода.
Разработал: Rene J. Buesa, Miami, USA.
Перевод с английского: Пешков М.В., 2009.

Достарыңызбен бөлісу: |