Импрегнация серебром для ретикулиновых волокон

Это аргирофильная неспецифическая реакция тонких стетеподобных поддерживающих волокон соединительной ткани (например, имеются в печени и костном мозге). Ретикулярные волокна – это молодые и тонкие отростки коллагеновых волокон, которые содержат в себе углеводные группы и способны связывать серебро, окисляясь до альдегидов. Но так как в них содержится очень мало углеводородов, необходима сенсибилизация (железоаммонийными квасцами).

2 мл 10% водного нитрата серебра

1 мл 10% водного гидроксида натрия (или калия)

0.5 мл концентрированного аммиака

Хорошо перемешать. Большая часть осадка растворится через 1-2 минуты.

40 мл дистиллированной воды.

10 мл концентрированного формальдегида

40 мл дистиллированной воды.

Готовить перед использованием.

1. Депарафинировать и довести до воды как обычно. Промыть в дистиллированной воде.

2. Перманганат калия 5 минут. Промыть в воде из-под крана 1 минуту.

3. Обесцветить щавелевой кислотой по одному. Промыть в воде из-под крана 1 минуту.

4. Обработать железоаммонийными квасцами 5 минут.

Промыть в 4 сменах водопроводной воды по 3 минуты каждая.

5. Промыть в 2 сменах дистиллированной воды по 3 минуты каждая.

6. Аммиачное серебро 5 минут.

7. Быстро промыть в чистой дистиллированной воде (одно-два макания).

8. Формалин 1 минута.

9. Промыть в дистиллированной воде 2 смены по 3 минуты.

10. Тонировать хлорным золотом (до посерения срезов 1-3-5 минут). Этап можно пропустить и тогда фон будет желтым. Промыть в дистиллированой воде.

11. Тиосульфат натрия 1 минута.

12. Промыть в дистиллированной воде.

13. Докрасить ядра нейтральным красным. Этап необязательный. Вместо этого красителя можно использовать световой зеленый для окраски фона в зеленый цвет, пикриновую кислоту водную для желтого фона или практически любой краситель по указанию патолога, либо не докрашивать вообще.

14. Обезводить, просветлить, заключить по общепринятой в лаборатории схеме.

ретикулярные волокна черные

фон зависит от докраски

ядра красные.

1. Ядра могут окрашиваться в черный цвет серебром.

2. Избыток серебра после проявления формалином можно извлечь в 0.5% водном растворе красной кровяной соли. Затем продолжить этапы как в методе.

3. При недостаточном окрашивании серебром можно после формалина хорошо промыть срезы в дистиллированной воде и повторить этапы окраски с 4 пункта метода.

Перевод с английского: Пешков М.В., 2009.